Обязательный лабораторный показатель для диагностики хронического гепатита

Для диагностики хронического гепатита ключевым лабораторным показателем является определение уровня гепатитовирусных антигенов и антител в сыворотке крови. Особенно важным является определение HBsAg (антигена вируса гепатита B) и анти-HCV (антител к вирусу гепатита C), поскольку их наличие подтверждает хроническую инфекцию.

Кроме того, анализы на уровень трансаминаз (АЛТ и АСТ) позволяют оценить активность воспалительного процесса в печени. Эти показатели помогают врачу установить диагноз, оценить степень повреждения печени и выбрать оптимальную тактику лечения.

«Клинические рекомендации «Хронический вирусный гепатит C» (утв. Минздравом России)

Вирусная нагрузка (ВН) представляет собой количественное измерение вирусной РНК в сыворотке крови и выражается в МЕ/мл.

Генотипы вируса гепатита C — это разнообразные формы вируса, которые классифицируются на основе отличий в нуклеотидных цепочках отдельных участков его генома. В рамках клинической практики эти генотипы играют важную роль в выборе противовирусной терапии, особенно если для лечения применяются препараты, специфические для определенного генотипа.

Гепатит — это воспалительный процесс в печеночной ткани, который определяется наличием негнойных изменений в печеночной биопсии.

Гепатоцеллюлярная карцинома — злокачественное образование печени, является одним из возможных неблагоприятных исходов хронического вирусного гепатита C, возникает, как правило, на фоне сформированного цирроза печени.

Коинфекция — это ситуация, когда организм заражается несколькими инфекционными агентами одновременно. В контексте хронического вирусного гепатита C речь идет о совместном воздействии с вирусами гепатита B, Д и ВИЧ.

Пангенотипный — это характеристика медикаментов или групп препаратов, которые демонстрируют эффективность по отношению ко всем основным генотипам вируса гепатита C.

Устойчивый вирусологический ответ (УВО) — отсутствие в крови РНК вируса гепатита C через 12 после окончания терапии.

Фиброз печени — это процесс, при котором паренхиматозная ткань печени замещается соединительной, что является универсальным ответом на хроническое повреждение.

Цирроз печени — это конечная стадия хронического заболевания печени, которая проявляется заменой печеночной паренхимы соединительной тканью и нарушением архитектуры органа. На начинающих этапах, когда функции печени всё еще сохранены, его называют компенсированным, а при утрате функций — декомпенсированным.

APRI — это некоммерческий индекс для оценки фиброза печени, представляющий собой метод неинвазивного диагностирования. Его можно использовать в случае, если эластометрия печени недоступна.

FIB-4 — некоммерческий расчетный индекс фиброза печени, метод неинвазивной диагностики. Может использоваться в качестве альтернативного при недоступности эластометрии печени.

METAVIR — популярная система оценки степени воспаления (от А0 до А3) и фиброза (от F0 по F4) в ткани печени. Применяется как для характеристики биоптата печени, так и для оценки фиброза печени неинвазивными методами (например, при эластометрии печени или расчете индекса фиброза) (см. Приложение Г).

1. Основная информация о заболевании или состоянии (группы заболеваний, состояний)

1.1 Определение заболевания или состояния (группы заболеваний, состояний)

Хронический вирусный гепатит C (ХВГС) — хроническое воспалительное заболевание в течение более 6 месяцев с преимущественным поражением ткани печени вследствие инфицирования вирусом гепатита C (ВГС или HСV — hepatitis C virus), которое может привести к тяжелым последствиям — циррозу (ЦП), раку печени (гепатоцеллюлярной карциноме, ГЦК) и летальному исходу [1].

1.2 Причины и механизмы заболевания или состояния (группы заболеваний, состояний)

Возбудителем ХВГС является ВГС, который представляет собой небольшой гепатотропный РНК-вирус из семейства Flaviviridae. Вирус состоит из нуклеокапсида, состоящего из сердцевинного (ядерного) белка (HCVcAg) и одноцепочечной (+) РНК, и белково-липидной оболочки, содержащей аполипопротеин E (апоE) человека и вирусные белки E1 и E2. Вирусный геном кодирует 10 различных белков, среди которых 3 описанных выше структурных и 7 неструктурных (p7, NS2, NS3, NS4A, NS4B, NS5A и NS5B) [2].

Выделяют 8 генотипов (ГТ) [3], которые обозначаются арабскими цифрами от 1 до 8, и несколько десятков субтипов ВГС, которые обозначаются латинскими буквами. Наибольшее клиническое значение имеют субтипы ГТ 1: a и b. Генотипы и субтипы различаются в последовательностях приблизительно на 30% и 20% соответственно. Вариабельность генома вируса обусловливает изменения в строении антигенных детерминант, которые определяют выработку специфических антител. Это препятствует элиминации вируса из организма и созданию эффективной вакцины против ВГС [4, 5].

Инфицирование ВГС в большей доле случаев (55 — 85%) приводит к хроническому течению заболевания и примерно у четверти больных приводит в течение последующих десятилетий к развитию ЦП, что, в свою очередь, может служить основой для формирования ГЦК [6]. Довольно часто ввиду преимущественного бессимптомного течения инфекции заболевание впервые проявляется осложнениями ЦП.

Основным патогенетическим механизмом хронического вирусного гепатита C (ХВГС) является нарушение взаимодействия клеток иммунной системы с инфицированными вирусом гепатоцитами. Повреждения печеночной ткани в значительной степени происходят вследствие активации иммунного ответа в области воспаления, а не из-за непосредственного цитопатического воздействия вируса [7]. Иммунные клетки накапливаются в печени, и часть их (NK-клетки, цитотоксические T-лимфоциты) обладает значительной цитотоксичностью, способной повреждать гепатоциты [8]. В результате взаимодействия инфицированных клеток печени с CTL-лимфоцитами (элементами адаптивной иммунной реакции) начинается процесс апоптоза. Обнаруживается дефицит T-клеток, угнетение функции макрофагов, снижение интерфероногенеза, отсутствие выработки специфических антител на антигены вируса, что, в свою очередь, нарушает способность иммунной системы адекватно распознавать и устранять вирусные антигены на поверхности гепатоцитов [8 — 11].

У больных с выраженным T-клеточным ответом происходит полная элиминация ВГС после перенесенного острого гепатита С. Вследствие взаимодействия вируса и иммунной системы происходит угнетение активности CTL-лимфоцитов белками вируса. В результате этого при ХВГС формируется иммунологическая толерантность к вирусу [12].

Действие вируса при ХВГС и вызванные им иммунологические реакции обусловливают не только повреждение печени, но и других органов и тканей. Концепция системных поражений при ХВГС заключается в возможности репликации вируса вне печени, а именно в тканях лимфоидного и нелимфоидного происхождения [13]. Размножение вируса в иммунокомпетентных клетках (лимфоцитах) приводит к нарушению их иммунологической функции. Сохранение ВГС в моноцитах является основной причиной реинфекции после трансплантации печени у больных тяжелыми формами ХВГС [10].

Среди факторов, связанных с хозяином, влияющих на исход и течение ХВГС, важным является возраст на момент инфицирования, злоупотребление алкоголем, наличие других инфекций с гепатотропными вирусами, расстройства липидного обмена и другие [14, 15].

1.3 Эпидемиология заболевания или состояния (группы заболеваний, состояний)

По оценочным данным в мире у 1% населения (порядка 71 млн человек) выявляются антитела к ВГС (anti-HCV), среди которых 2/3 хронически инфицированы, и 1/3 выздоровели самостоятельно или вследствие излечения. Заболевание шире распространено в Африке и Азии (почти 3% населения), в то время как в Америке и Европе оно выявляется у 1,5 — 2,0% [17]. Достоверная распространенность ХВГС в РФ остается неизвестной, расчетное число пациентов может достигать 4,9 млн [16]. По данным Роспотребнадзора в субъектах РФ по состоянию на 01.01.2017 на диспансерном учете состояло 591 830 пациентов с ХВГС [16].

В России наиболее распространенными генотипами являются 1 (52,6%, из которых 3,7% — это подтип 1a и 48,9% — подтип 1b) и 3 (39,6%), в то время как генотип 2 встречается значительно реже (7,8%). Генотипы 4 — 6 регистрируются менее чем в 0,01% случаев, а 7 и 8 — исключительно редко [16]. С введением пангенотипных схем противовирусного лечения ХВГС значимость генотипа вируса начинает снижаться, однако всё еще существуют некоторые генотип-специфичные препараты, для которых необходимо уточнение генотипа перед их использованием.

Источником инфекции является больной человек. Наиболее значимым является парентеральный путь передачи (при употреблении внутривенных наркотических препаратов, медицинских манипуляциях, травмирующих косметических процедурах, включая маникюр и педикюр, нанесение татуировок и установку пирсинга), существенно реже — половой и вертикальный пути передачи [18].

Риск профессионального заражения медицинских работников при случайном уколе игрой, контаминированной инфицированной кровью, составляет около 1,8%. При попадании крови пациента на поврежденную кожу или неповрежденные слизистые медицинского работника риск инфицирования значительно меньше, а попадание ее на неповрежденную кожу безопасно.

В связи с этим риск заражения для медицинского персонала мал. Риск инфицирования пациента от зараженного медицинского работника крайне мал [18]. Риск перинатальной передачи инфекции составляет 5 — 10% и мало зависит от способа родоразрешения, однако возрастает при наличии коинфекции ВИЧ у матери до 14 — 16% [18]. Низкая концентрация вируса в секретах половых желез и органах определяют низкий риск его передачи половым путем: около 0,5% в год при незащищенном половом контакте в моногамной гетеросексуальной паре, около 0,4 — 1,8% в год среди лиц, оказывающих сексуальные услуги [19], около 0,8% в год среди мужчин, практикующих секс с мужчинами с моноинфекцией ВГС (при коинфекции ВИЧ он выше в 4 раза) [20].

Вирус гепатита C отличается сравнительно низкой устойчивостью к различным внешним воздействиям. Известно, что он сохраняет активность при температуре до 50 °C, однако полное разрушение происходит через 30 минут при 60 °C и за 2 минуты при 100 °C. Вирус чувствителен к ультрафиолетовому облучению и воздействиям липидных растворителей [21].

1.4 Особенности кодирования заболевания или состояния (группы заболеваний или состояний) по Международной статической класификации болезней и проблем, связанных со здоровьем

B18.2 — хронический вирусный гепатит C.

Ранее использовавшийся код Z22.5 для лиц, носителей вирусного гепатита, был исключён из нового пересмотра МКБ 10.

1.5 Классификация заболевания или состояния (группы заболеваний, состояний)

Заболевание классифицируют в зависимости от ГТ ВГС, а также наличия ЦП и внепеченочных проявлений.

1 — слабовыраженный фиброз;

На этапе скрининга

• Скрининг на хронический вирусный гепатит C путем выявления anti-HCV в группах риска
• Если anti-HCV обнаружены, необходимо провести тест на РНК ВГС

• Если отсутствует возможность, можно использовать тест на HCVcAg. Этот антиген в сыворотке или плазме крови также служит маркером репликации вируса.

• Беременные женщины
• Реципиенты крови и её компонентов, органов и тканей
• Медицинский персонал
• Пациенты, проходящие гемодиализ, пересадку почек, сердечно-сосудистую и лёгочную хирургию, а также гематологические процедуры
• Пациенты наркологических и кожно-венерологических учреждений
• Опекаемые и сотрудники стационаров для детей или взрослых
• Контактные лица в очагах острого и хронического гепатита С
• Лица, употребляющие инъекционные наркотики и их половые партнёры
• Профессиональные секс-работники и их партнёры
• Мужчины, имеющие половые связи с мужчинами
• Лица с множеством случайных половых партнёров
• Лица, сделавшие татуировки
• Заключённые
• Доноры крови, органов, тканей и спермы
• Пациенты с иммунодефицитом (например, при онкологических заболеваниях, на гемодиализе, при лечении иммунодепрессантами и др.)
• Пациенты с заболеваниями печени неясного происхождения (в ходе первичного клинико-лабораторного обследования)

• При обнаружении anti-HCV и отрицательной РНК ВГС (или HCVcAg в случае недоступности первого) рекомендуется провести повторный анализ РНК ВГС через 12 и 24 недели, чтобы подтвердить или опровергнуть наличие ХВГС и удостовериться в естественном очищении организма от вируса.

• Определение генотипа вируса гепатита С (ГТ ВГС) рекомендуется только пациентам с ХВГС для планирования противовирусной терапии, специфичной к генотипу.
• При наличии цирроза или симптомов внегепатических проявлений (лимфопролиферативные заболевания) необходимо провести общий (клинический) анализ крови расширенного объема. При циррозе часто наблюдается тромбоцитопения различной степени, реже — другие виды цитопений.
• Всем пациентам следует провести биохимический анализ крови для оценки активности трансаминаз (аланинаминотрансфераза, аспартатаминотрансфераза), тяжести повреждения гепатоцитов, а также для анализа функции печени и почек.
• Определение протромбинового времени в крови или плазме.

• Исследование уровня альфа-фетопротеина (АФП) в сыворотке крови необходимо пациентам с выраженным и тяжелым фиброзом печени (F3-F4 по METAVIR) для ранней диагностики гепатоцеллюлярной карциномы (ГЦК).

На этапе ПВТ

• Лабораторный мониторинг не рекомендуется для пациентов с ХВГС без цирроза в ходе противовирусной терапии без применения рибавирина**
• При использовании рибавирина** необходимо проводить общий (клинический) анализ крови каждые 2-4 недели для исключения развития анемии, как часто наблюдаемого побочного эффекта препарата.

• Не следует определять РНК во время лечения для оценки его эффективности.

• Не используйте анализ anti-HCV для контроля за реинфицированием у пациентов, выздоровевших от ХВГС после противовирусной терапии.
• Всем пациентам, прошедшим курс лечения ХВГС, рекомендуется проверка РНК ВГС через 12 недель после окончания терапии для оценки её эффективности (УВО12). Отсутствие РНК ВГС через 12 недель свидетельствует о выздоровлении от ХВГС, так как поздний рецидив наблюдается менее чем в 0,2% случаев.

• Определение уровня АФП у пациентов с выраженным фиброзом печени (F3 по METAVIR) и циррозом 1 раз в полгода для диагностики ГЦК.

Оценка результатов исследования

Результат исследования выражается качественно – положительный или отрицательный. Отрицательный результат исследования указывает на отсутствие антител JgM к ВГС в сыворотке крови. Положительный результат – выявление антител JgM к ВГС свидетельствует о начальной стадии острого вирусного гепатита С, остром периоде инфекции, ранней стадии реконвалесценции или активном хроническом вирусном гепатите С.

Вирус гепатита С в крови в норме отсутствует. В отличие от серологических методов диагностики ВГС, где обнаруживают антитела к ВГС, ПЦР позволяет выявить наличие непосредственно РНК ВГС в крови как качественно, так и количественно. Определяемым фрагментом в обоих служит консервативный участок генома гепатита С.

Обнаружение только антител к ВГС подтверждает лишь факт инфицирования пациента, но не позволяет судить об активности инфекционного процесса (о репликации вируса), о прогнозе заболевания. Кроме того, антитела к вирусу ГС обнаруживают как в крови больных острым и хроническим гепатитом,так и у тех пациентов, кто болел и выздоровел, а нередко антитела в крови появляются только спустя несколько месяцев после появления клинической картины заболевания, что затрудняет диагностику. Обнаружение вируса в крови методом ПЦР – более информативный метод диагностики.

Качественное обнаружение вируса гепатита C с помощью ПЦР в крови указывает на виремию и позволяет оценить размножение вируса в организме, что является одним из показателей успешности противовирусной терапии.

Аналитическая чувствительность метода ПЦР составляет не менее 50-100 вирусных частиц в 5 мкл, прошедшей выделение ДНК-пробы, специфичность – 98%. Обнаружение РНК вируса гепатита С с помощью ПЦР на ранних этапах развития вирусной инфекции (возможно уже через 1-2 недели после заражения) на фоне полного отсутствия каких-либо серологических маркеров может служить самым ранним свидетельством инфицирования.

Однако изолированное выявление РНК вируса гепатита С на фоне полного отсутствия каких-либо других серологических маркеров не может полностью исключить ложноположительный результат ПЦР. В таких случаях требуется всесторонняя оценка клинических, биохимических и морфологических исследований и повторное неоднократное подтверждение наличия инфекции ПЦР.

Согласно рекомендациям Всемирной организации здравоохранения, для точного подтверждения диагноза вирусного гепатита C необходимо трижды обнаружить РНК вируса гепатита C в крови пациента.

Обнаружение РНК вируса гепатита C с использованием метода ПЦР применяется для следующих целей:

Обнаружение вируса гепатита С методом ПЦР (количественно)

Количественный метод определения содержания РНК вируса гепатита С в крови дает важную информацию об интенсивности развития заболевания, об эффективности лечения и о развитии резистентности к антивирусным препаратам. Аналитическая чувствительность метода составляет от 5.102 копий/мл вирусных частиц в сыворотке крови, специфичность – 98%.

Уровень виремии определяется следующим образом: если содержание РНК ВГС составляет от 10^2 до 10^4 копий/мл – это низкий уровень; от 10^5 до 10^7 копий/мл – средний уровень; и свыше 10^8 копий/мл – высокий уровень.

Количественное определение содержания РНК ВГС в сыворотке крови методом ПЦР имеет важное значение для прогноза эффективности лечения интерфероном-альфа. Показано, что наиболее благоприятный прогноз заболевания и наибольшую вероятность положительного ответа на противовирусную терапию имеют лица с низким уровнем виремии. При эффективном лечении уровень виремии снижается.

Диагностика гепатита С

Основным лабораторным методом выявления гепатита С является определение в крови анти-HCV IgG и anti-HCV IgM методом иммуноферментного анализа. Антитела обнаруживаются в крови после 2-х недель заболевания. Высокая концентрация IgM свидетельствует об остром течении болезни. Также антитела присутствуют в крови у выздоровевших в течение 8-10 лет в более низких концентрациях. Тест считается скрининговым и проводится при обследовании доноров, беременных женщин, подозрении на заболевание гепатитом.

Для исключения ложноположительного результата проводится обнаружение в крови РНК возбудителя с помощью ПЦР. С этой же целью используется метод иммуноблоттинга – определение в крови больного антител к специфическим вирусным белкам.

Для оценки состояния печени применяются такие методы, как фибросканирование и УЗИ органов. Оба метода являются неинвазивными и безопасными для пациента, они позволяют получить информацию о стадии воспалительных процессов, изменениях в структуре печени, а также о наличии фиброза и поражениях, вызванных вирусами. Из всех перечисленных методов, фибросканирование обеспечивает более полные и современные данные. В некоторых случаях также может быть рекомендована биопсия печени. В нашей лаборатории предлагается уникальный комплексный анализ ФиброМакс, который позволяет определить состояние печени, используя набор расчетных тестов для выявления патологий печени.

Проводится общий и биохимический анализ крови, определяется активность печеночных ферментов и билирубина. При заболевании гепатитом С нарушается синтез протромбина в печени, вследствие чего снижается свертываемость крови. Изменения лейкограммы являются неспецифическими и указывают на развитие воспаления.

Для дифференциальной диагностики гепатита С с другими видами гепатитов делают анализ на выявление аутоантител к ферментам печени и эпителию почечных канальцев.

Какой лабораторный показатель обязателен для постановки диагноза хронического гепатита с

Данное комплексное исследование особенно актуально для пациентов с установленным диагнозом вирусного гепатита С, поскольку оно позволяет детализировать инфекционный процесс, определить генотип вируса, уровень вирусемии и оценить антительный ответ. Эти данные имеют ключевое значение для выбора оптимальной схемы этиотропного лечения.

Синонимы на русском

Антитела к структурным и неструктурным белкам вируса гепатита С; вирусная нагрузка гепатита С.

Синонимы на английском

HCV, генотипирование, РНК; HCV, РНК количественно, РНК ВГС.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Как правильно подготовиться к исследованию?

• В течение 24 часов до исследования избегайте употребления жирной пищи.
• Не курите за 30 минут до исследования.

Общая информация о проведении исследования

Хронический гепатит С – это заболевание печени, вызванное вирусом, который разрушает клетки печени и при длительном течении может приводить к развитию цирроза и рака печени. Поэтому при выявлении вирусного гепатита С необходимо пройти обследование печени у гепатолога и начать противовирусное лечение.

На этапе предварительной диагностики сдают анализы крови, которые оценивают характеристики вируса, активность воспаления в печени.

Существуют антитела к структурным (ядровым, core) и неструктурным (nonstructural, NS) белкам вируса гепатита. Определение их уровня необходимо для оценки активности вируса, вирусной нагрузки, возможности развития хронической формы заболевания и степени повреждения печени.

Антитела Anti-HVC core IgG возникают на протяжении хода хронического процесса и не используются для диагностики острого гепатита С. Эти антитела достигают максимальной концентрации к пятому-седьмому месяцу болезни и остаются обнаруживаемыми у пациентов, страдающих хронической формой, на протяжении всей жизни.

Anti-HVC IgМ являются антителами острого периода и говорят об уровне виремии. Их концентрация нарастает в течение первых 4-6 недель болезни, а после перехода процесса в хронический уменьшается вплоть до исчезновения. Повторно в крови больного иммуноглобулины класса М могут появляться при обострении заболевания.

Антитела к неструктурным белкам (Anti-HVC NS) могут быть обнаружены на различных этапах заболевания. Ключевыми из них являются NS3, NS4 и NS5. Anti-HVC NS3 — это самые ранние антитела, сигнализирующие о остром гепатите С. Их титр (число) может быть использован для оценки вирусной нагрузки в организме пациента.

Anti-HVC NS4 и NS5 – антитела хронической фазы. Считается, что их появление связано с поражением ткани печени. Высокий титр Anti-HVC NS5 указывает на наличие в крови вирусной РНК, а его постепенное снижение – на начало фазы ремиссии. Эти антитела длительное время после выздоровления присутствуют в организме.

Для определения длительности лечения следует установить генотип вируса. Также до начала противовирусной терапии необходимо определить исходную вирусную нагрузку (количество РНК ВГС).

Количественная нагрузка – ПЦР HCV – один из самых важных критериев, который позволяет оценить концентрацию вирусной РНК (вирусную нагрузку) в крови. Этот показатель выражается в цифрах, единицы измерения МЕ/мл (международные единицы на миллилитр). Вирусная нагрузка показывает степень инфицирования и количество вирусов в крови.

Генотип вируса гепатита С представляет собой второй важный анализ, позволяющий косвенно оценить вероятность успешного лечения, подобрать необходимые дозировки медикаментов и установить длительность терапии, что непосредственно влияет на выбор лечебных препаратов. Генотип остается стабильным в течение всей жизни, однако в редких случаях возможно наличие нескольких генотипов у одного пациента.

Генотипов несколько: от 1 до 6 (иногда выделяют 11), при этом у первого есть подтипы — 1а и 1б, – которые могут лечиться разными препаратами в зависимости от тяжести течения и наличия сопутствующих заболеваний.

Исследование одномоментно позволяет охарактеризовать инфекционный процесс – определить генотип возбудителя, выраженность вирусемии и специфического иммунного ответа, что необходимо для планирования продолжительности и эффективности противовирусной терапии (ПВТ), а в отдельных случаях – для расчета дозы противовирусных препаратов.

Когда назначается исследование?

• При подтвержденном диагнозе вирусного гепатита С (независимо от стадии инфекционного процесса) перед началом терапии.

Что означают результаты?

Для каждого показателя, входящего в состав комплекса:

• Антитела к структурным и неструктурным белкам вируса гепатита С.
• HCV, генотипирование (типы 1a, 1b, 2, 3a, 4), РНК [реал-тайм ПЦР].
• HCV, РНК количественно [реал-тайм ПЦР].

Важно учитывать

• Решение о продолжительности лечения, выборе препаратов и их дозах может принимать только лечащий врач, исходя из данных клинических исследований и инструментальной диагностики (в случае необходимости).
• Лечебные схемы разрабатываются, принимая во внимание пол, возраст пациента, а также клинические и лабораторные данные.
• У пациентов с хроническим гепатитом С (ХГС) неверно интерпретированные лабораторные результаты могут привести к серьезным гепатологическим осложнениям.
• Генотипирование вируса позволяет не только подобрать эффективную схему терапии, но и предсказать её результат: генотип 1 хуже поддается лечению по сравнению с генотипами 2 и 3.
• При выраженной реакции на лечение (снижение вирусной нагрузки < 50 МЕ/мл за 4 недели) возможно сокращение сроков терапии.
• Отсутствие клинической реакции (снижение вирусной нагрузки за 12 недель менее чем на 2 порядка) указывает на низкую эффективность выбранной схемы лечения.
• У пациентов с генотипами 2 и 3 в 80% случаев отмечается высокая эффективность противовирусной терапии (ПВТ).

HCV, РНК количественно [реал-тайм ПЦР]

Исследование для выявления возбудителя гепатита C (HCV), в ходе которого с помощью метода полимеразной цепной реакции в реальном времени (РТ-ПЦР) определяется наличие генетического материала (РНК) вируса и его количество (вирусная нагрузка) в образце крови.

РНК HCV может быть обнаружена в концентрации, находящейся за нижней границей линейного диапазона концентраций. Линейный диапазон концентраций – это диапазон, в котором можно точно посчитать количество копий возбудителя. Для данного анализа линейный диапазон концентраций ДНК HCV, определяемых детектирующим амплификатором, составляет 7,5×10 2 – 1,0×10 8 копий/мл образца.

Синонимы русские

Вирус гепатита С (ВГС), количественная оценка РНК.

Синонимы английские

Hepatitis C Virus RNA, Quantitative, Real-Time PCR, Blood, HCV Viral Load, Hepatitis C Virus RNA Quant.

Метод исследования

Полимеразная цепная реакция с обратной транскрипцией в реальном времени.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Как корректно подготовиться к исследованию?

Не курить в течение 30 минут до сдачи крови.

Общая информация об исследовании

Вирус гепатита С (HCV) – РНК-содержащий вирус из семейства Flaviviridae, который поражает печень. Он способен размножаться в клетках крови (нейтрофилах, моноцитах и макрофагах, В-лимфоцитах) и вызывать криоглобулинемию, болезнь Шегрена и В-клеточные лимфопролиферативные заболевания. HCV благодаря высокой мутационной активности способен избегать воздействия защитных механизмов иммунной системы. Существует 6 генотипов и множество субтипов вируса, которые имеют разные значения для прогноза развития заболевания и эффективности противовирусной терапии.

Основной путь передачи инфекции – это кровь (переливание компонентов крови и плазмы, донорские органы, нестерильные шприцы, иглы, а также инструменты для татуировок и пирсинга). Возможно передача при половом контакте и от матери к ребенку во время беременности, однако подобные случаи довольно редки.

Острый вирусный гепатит, как правило, характеризуется бессимптомным течением и остается невыявленным в большинстве случаев. Только у 15 % инфицированных заболевание протекает остро – с тошнотой, ломотой в теле, отсутствием аппетита и потерей веса (редко сопровождается желтухой). У 60-85 % инфицированных развивается хроническая инфекция, что в 15 раз превышает частоту хронизации при гепатите В. Хронический вирусный гепатит С протекает с повышением печеночных ферментов и скудным проявлением симптомов. У 20-30 % больных заболевание приводит к циррозу печени, увеличивая риск развития печеночной недостаточности и гепатоцеллюлярной карциномы.

Выявление РНК HCV свидетельствует о размножении вируса в организме и является методом диагностики заболевания. Генетический материал вируса можно обнаружить с помощью ПЦР через 10-12 дней после инфицирования – в этот период специфические антитела, которые образуются через несколько месяцев после заражения, отсутствуют и биохимические показатели функции печени находятся в пределах референсных значений.

Метод ПЦР позволяет качественно или количественно выявлять РНК вируса. С помощью качественного анализа подтверждается наличие вируса гепатита С и его активность. Количественная оценка вирусной нагрузки с учетом генотипа HCV помогает контролировать эффективность терапии и спрогнозировать развитие заболевания.

Эффективность проведенного лечения оценивается по уровню РНК до начала и во время терапии. Обычно вирусная нагрузка в крови снижается в несколько раз в течение первых трех месяцев эффективного лечения. При успешной терапии уровень виремии уменьшается на два порядка в первые 4-12 недель, а по окончании курса терапии в крови не обнаруживается генетический материал вируса.

Отсутствие снижения виремии через 12 недель с начала лечения указывает на его неэффективность. Рекомендовано проводить анализ до начала терапии, на 4-й, 12-й и 24-й неделях лечения и через 24 недели после окончания курса. Длительность терапии и периодичность количественного определения РНК вируса гепатита С зависит от генотипа вируса и степени повреждения печени.

Для чего необходимо исследование?

• Для подтверждения диагноза «вирусный гепатит С».
• Для прогнозирования течения вирусного гепатита С.
• Для контроля противовирусного лечения и принятия решений о дальнейшей стратегии лечения.

Когда назначается исследование?

• При эффективном выявлении РНК вируса гепатита С.
• При остром и хроническом вирусном гепатите С.
• При смешанных гепатитах.
• При планировании, во время и после завершения противовирусной терапии.

Что означают результаты?

• Не обнаружено – РНК вируса гепатита С не была найдена или уровень ниже предела чувствительности теста (200 копий/мл = 40 МЕ/мл).
• Копий/мл (МЕ/мл) – РНК вируса гепатита С обнаружена. Низкая виремия (благоприятный прогноз течения заболевания и эффективности терапии).
• > 2*10^6 копий/мл (>8*10^5 МЕ/мл) – РНК вируса гепатита С обнаружена. Высокая виремия.
• >1,0*10^8 копий/мл (>2,4*10^7 МЕ/мл) – РНК вируса гепатита С обнаружена в концентрации выше диапазона линейных значений.

Линейный диапазон концентраций РНК вируса гепатита С, определяемых детектирующим амплификатором, составляет 7,5*10^2 – 1,0*10^8 копий/мл (1,8*10^2 – 2,4*10^7 МЕ/мл).

Что может повлиять на результаты?

Недостоверный результат может быть получен при:

• Загрязнение образца.
• Наличие в образце ингибиторов – химических и белковых веществ, которые могут повлиять на различные элементы ПЦР.
• Присутствие гепарина в крови.

Важные замечания

• Уровень вирусной нагрузки в крови не отражает степень повреждения печени и тяжесть заболевания. Для их оценки необходимы биохимические исследования и анализы биопсии.
• При планировании лечения крайне важно установить генотип вируса гепатита С.

Дополнительно рекомендуется:

• Anti-HCV, антитела, ИФА.
• Аnti-HCV, антитела.
• Антитела к структурным и неструктурным белкам вируса гепатита.
• HCV, РНК [реал-тайм ПЦР].
• HCV, генотипирование, РНК [реал-тайм ПЦР].
• Гамма-глютамилтрансфераза (гамма-ГТ).
• Аланинаминотрансфераза (АЛТ).
• Аспартатаминотрансфераза (АСТ).
• Щелочная фосфатаза общая.
• Альбумин в сыворотке.
• Общий билирубин.
• Общий холестерин.
• Тромбиновое время.
• Фибриноген.
• Общий анализ крови (без лейкоцитарной формулы и СОЭ).
• Лейкоцитарная формула.
• Скорость оседания эритроцитов (СОЭ).

Кто назначает исследование?

• Lerat H, Rumin S, Habersetzer F и др. Взаимодействие геномных последовательностей вируса гепатита С с клетками кроветворения: влияние вирусной нагрузки, генотипа вируса и клетки. Blood. 1998 May 15;91(10):3841-9.PMID:9573022.
• Revie D, Salahuddin SZ. Человеческие клетки, важные для репликации вируса гепатита С in vivo и in vitro: старые утверждения и актуальные данные. Virol J. 2011 Jul 11;8:346. doi: 10.1186/1743-422X-8-346. PMID:21745397.

ООО «ЭлитЛаб»Лицензия № Л041-01197-26/00344945 от 08.08.2018

• Для пациентов
• Для врачей
• Анализы и расценки
• Адреса медицинских учреждений
• О компании

• Правовая информация
• Политика конфиденциальности